ELISA settið er byggt á föstu fasa mótefnavaka eða mótefna og ensímmerkingu mótefnavaka eða mótefna. Mótefnavakinn eða mótefnið sem er bundið við yfirborð föstu burðarins heldur enn ónæmisfræðilegri virkni sinni og ensímmerkt mótefnavakinn eða mótefnið heldur bæði ónæmisfræðilegri virkni sinni og ensímvirkni. Á þeim tíma sem ákvarðað er, hvarfast sýnið sem er í prófun (þar sem mótefnið eða mótefnavakinn er mældur) við mótefnavakann eða mótefnið á yfirborði föstu burðarins. Mótefnavaka-mótefnaflókið sem myndast á föstu burðarefninu er aðskilið frá öðrum efnum í vökvanum með þvotti.
Ensímmerktum mótefnavakum eða mótefnum er bætt við sem bindast einnig fasta burðarefninu með hvarfi. Á þessum tíma er magn ensíms í fasta fasanum í réttu hlutfalli við magn efnisins í sýninu. Eftir að hvarfefni ensímhvarfsins hefur verið bætt við, er hvarfefnið hvatað af ensíminu til að verða litaðar vörur. Magn vörunnar er í beinu samhengi við magn prófaðs efnis í sýninu, svo hægt er að framkvæma eigindlega eða megindlega greiningu í samræmi við dýpt litarins.
Mikil hvarfavirkni ensíma magnar óbeint upp niðurstöður ónæmissvörunar, sem gerir greiningu mjög viðkvæma. ELISA er hægt að nota til að ákvarða mótefnavaka, en einnig er hægt að nota til að ákvarða mótefni.
Grunnreglur ELISA Kit
Það notar sérstakt hvarf mótefnavaka og mótefna til að tengja hlutinn við ensím og framleiðir síðan litahvörf milli ensíms og hvarfefnis til magnbundinnar ákvörðunar. Mælingin getur verið mótefni eða mótefnavaki.
Það eru þrjú hvarfefni nauðsynleg í þessari ákvörðunaraðferð:
â Föstfasa mótefnavaka eða mótefni (ónæmisaðsogsefni)
â¡ Ensímmerkt mótefnavaka eða mótefni (merki)
⢠hvarfefni fyrir ensímvirkni (litaþróunarefni)
Í mælingunni er mótefnavakinn (mótefnavakinn) fyrst bundinn við fasta burðarefnið, en heldur samt ónæmisvirkni sinni, og síðan er samtengingu (merki) af mótefni (mótefnavaka) og ensími bætt við sem heldur upprunalegri ónæmisvirkni og ensími. starfsemi. Þegar samtengingin hvarfast við mótefnavakann (mótefni) á föstu burðarefninu er samsvarandi hvarfefni ensímsins bætt við. Það er, hvata vatnsrof eða REDOX hvarf og litur.
Litbrigðin sem það framleiðir er í réttu hlutfalli við magn mótefnavaka (mótefna) sem á að mæla. Þessa lituðu vöru er hægt að sjá með berum augum, sjónsmásjá, rafeindasmásjá, einnig er hægt að mæla með litrófsmæli (ensímmerkistæki). Aðferðin er einföld, þægileg, hröð og sértæk.